JLZZJLZZJLZZ,亚洲日韩图区一区二区,欧美福利午夜久久,久久精品岛国av一区二区无码

15522676233
TECHNICAL ARTICLES

技術(shù)文章

當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章流式細(xì)胞儀檢測樣品的制備方法

流式細(xì)胞儀檢測樣品的制備方法

更新時間:2022-01-14點擊次數(shù):2167
  流式細(xì)胞檢測樣品推薦制備方法:
 
  A. 直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體):
 
  (1) 、收集1×106個細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
 
  (2) 、用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
 
  (3) 、用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
 
  (4) 、用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細(xì)胞。
 
  B. 未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
 
  (1)、收集2×106個細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
 
  (2)、用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
 
  (3)、用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
 
  (4)、加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
 
  (5)、加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
 
  (6)、加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測。
 
  (7)、流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細(xì)胞。
 
  C.細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
 
  (1)、待測樣本制成單細(xì)胞懸液,然后2000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,棄上清。
 
  (2)、用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存,至少固定18小時。
 
  (3)、調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
 
  (4)、PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。
聯(lián)系方式

15522676233

(全國服務(wù)熱線)

北京市海淀區(qū)溫泉鎮(zhèn)創(chuàng)客小鎮(zhèn)社區(qū)配套商業(yè)樓

3007606172@qq.com

關(guān)注我們

Copyright © 2025北京百奧創(chuàng)新科技有限公司 All Rights Reserved   工信部備案號:京ICP備17019404號-2

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)   管理登錄   sitemap.xml

關(guān)注

聯(lián)系
聯(lián)系
頂部
蜜桃懂色91一区三区四区| 国产亚视频A| 在线精品秘 一区二区| 亚洲AV无码专区久久青青草原| 一级精品久久久久久久久| 人妻未亡人丝袜| 欧美日韩一本道视频| 国产 日韩 欧美一区| 婷婷五月综合久久中| 一起草欧洲无码青青草| 日韩高清影片一区二区三区| www亚洲av日韩av无码av| 色欲在线第一页| 男女艹逼视频网站| 91成人激情在线| japan中文熟女一二区| 91精品产国一二三区在线观看| 无码一区二飞| 久久久久无码精品l国产699| 男生爆操女生的网站| 丰满人妻妇伦又伦精品国产导航| 欧美 日韩亚洲图片| 色综合久久久无码精品| 午夜人妻一二三专区| 艹免费视频网站| 亚洲乱伦视频网站| 五月天婷婷色情av| 大鸡巴插小比| 天天色天天很天天曰| 日韩中文字幕久久有码| 人妻少妇后入AV| 大黑吊亚洲欧洲| 无码精品最新在线观看2020| 亚洲熟女成人三区| 尹人在线播放精品| 国产女生操到高潮| 中文字幕精品人妻一区二区三| 伦理合集久久国产精品中文字幕| 欧美精品免费 日本| 日本品一品二品三免费网站| 黄色影色\院|