jetMESSENGR®是一種高效溫和的mRNA轉(zhuǎn)染試劑。與DNA轉(zhuǎn)染相比,mRNA轉(zhuǎn)染具有許多優(yōu)點:
★ 沒有基因組整合的風險,因此轉(zhuǎn)染細胞沒有基因組修飾;
★ 無啟動子調(diào)控問題;
★ 無需到達細胞核進行有效表達;
★ 更溫和的過程;
Polyplus轉(zhuǎn)染試劑jetMESSENGER的作用有哪些呢?
一、mRNA 轉(zhuǎn)染
jetMESSENGER®非常適合通過mRNA轉(zhuǎn)染在神經(jīng)元、原代細胞、干細胞和各種癌癥細胞系等難以轉(zhuǎn)染的細胞中表達基因(圖1和圖2)。
圖1 jetMESSENGER®介導的不同難以轉(zhuǎn)染細胞的轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染后48小時通過熒光顯微鏡分析各種細胞系。使用jetMESSENGER®/eGFP mRNA(5meC,偽尿苷,Trilink™) 根據(jù)制造商的建議。有關OVCAR-3、NCCIT、MDA-MB-231和SW1353細胞系的數(shù)據(jù)由Inserm U1199?BioTICLA?(法國卡昂)提供。
jetMESSENGER®能夠在原代神經(jīng)元中實現(xiàn)高轉(zhuǎn)染效率,同時在幾天內(nèi)保持生理和健康的細胞形態(tài),允許在神jing病學應用中長期表達(圖3)。
三、CRISPR/Cas9應用
四、細胞重編程
用jetMESSENGER®轉(zhuǎn)染的細胞顯示出高活力和感興趣蛋白質(zhì)的長期表達,使jetMESSENGER®成為重編程研究的理想轉(zhuǎn)染試劑?,F(xiàn)在可以將身體的任何細胞轉(zhuǎn)化為多能干細胞。例如,可以使用信使核糖核酸轉(zhuǎn)染jetMESSENGER®將成纖維細胞轉(zhuǎn)化為IP。
圖4 jetMESSENGER®適用于轉(zhuǎn)染BJ細胞(人成纖維細胞)中的mRNA。轉(zhuǎn)染后48小時通過亮場和熒光顯微鏡分析BJ細胞。使用jetMESSENGER®/eGFP信使核糖核酸(5meC,偽尿苷,Trilink™) 根據(jù)制造商的建議。
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