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細胞復蘇有何注意事項?

更新時間:2023-09-14點擊次數(shù):1241

細胞復蘇是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細胞解凍之后重新培養(yǎng),細胞恢復生長的過程。那么你知道在細胞復蘇過程中有何注意事項嗎?讓我們一起來看看吧!

1. 取凍存細胞時應做好防護措施,戴好防凍手套,護目鏡。如果凍存管密封不嚴,液氮可被吸入。由于解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,將可能發(fā)生爆炸。

2. 細胞放入水浴中復蘇時注意用鑷子夾住細胞凍存管并在水浴中不時晃動,使其受熱均勻,且速度越快越好,這樣可以最大限度的保存細胞活力,并防止水浴鍋的水進入細胞凍存管造成細胞污染。

3. 打開細胞凍存管之前要用酒精棉球?qū)龃婀芟静⒘栏?。注意無菌操作,細胞復蘇后的操作在4℃冰盒中進行,以減少冷凍保護劑對細胞的毒性。

4. 解凍時間在2min以內(nèi)完成,且整個過程盡量避免吹打細胞產(chǎn)生氣泡,導致細胞復蘇后的生長狀態(tài)不佳。

5. 復蘇細胞的時候盡量避免凍存管接縫處沾水,防止支原體污染,實驗室定期用過氧化氫熏蒸,細胞小黑點增多時用支原體檢測試劑盒檢測,并且及時清除。

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