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細胞培養(yǎng)的常見問題及解決方法

更新時間:2023-10-26點擊次數(shù):1047
  你知道細胞培養(yǎng)的常見問題及解決方法嗎?讓我們一起來看看吧!
  一、培養(yǎng)細胞不貼壁
  原因:
  1.胰蛋白酶消化過度;
  2.支原體污染;
  解決方法:
  1.縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度;
  2.分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物;
  二、懸浮細胞成簇
  原因:
  1.培養(yǎng)液中含鈣,鎂離子;
  2.支原體污染;
  3.蛋白酶過度消化使得細胞裂解;
  解決方法:
  1.用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細胞,輕巧吹吸
  2.細胞獲得單細胞懸液;
  3.分離培養(yǎng)物,檢測支原體;
  三、培養(yǎng)細胞生長緩慢
  原因:
  1.由于更換不同培養(yǎng)液或血清;
  2.培養(yǎng)液中一些細胞生長必須成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞;
  3.培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;
  解決方法:
  1.比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗,讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;
  2.換入新鮮配置培養(yǎng)液,或補加谷氨酰胺及生長因子;
  3.用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物;
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