Meridian高特異性高保真Pfu酶是一種基于核酸適配體的熱啟動高保真DNA聚合酶,非常適合常規(guī)測序、NGS文庫擴(kuò)增和用于克隆和蛋白表達(dá)的DNA片段擴(kuò)增。Pfu 高保真熱啟動聚合酶的高度持續(xù)合成能力給PCR 反應(yīng)提供了非常高的產(chǎn)量和靈敏度,以及針對GC-和AT -富集靶點(diǎn)的出色擴(kuò)增。DNA適配體可逆地與聚合酶結(jié)合,在室溫下抑制其活性,并在室溫條件下防止非特異性擴(kuò)增。
MeridianPfu酶預(yù)混液具有高靈敏度和高產(chǎn)量的特點(diǎn),對1.2 kb的F8基因片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增。 對人類基因組DNA進(jìn)行5倍序列稀釋。所有反應(yīng)均根據(jù)不同供應(yīng)商推薦的條件設(shè)置,標(biāo)記物為HyperLadder™ 50bp(BIO-33054).結(jié)果表明,使用Pfu高保真熱啟動聚合酶擴(kuò)增DNA時(shí),產(chǎn)物的產(chǎn)量和敏感性都更高。
對高GC含量 (20-70%) 的DNA的高效擴(kuò)增
對人類基因組DNA以下基因進(jìn)行擴(kuò)增:RBB8 161bp (29%GC)、RBB8 450bp(32%GC)、IL10 417bp (44% GC)、Mpex418bp (55%GC)、 EGFR 525 bp (62%GC), EGFR380 bp (65% GC)。 標(biāo)記物為HyperLadder™ 50 bp(BIO-33054)。結(jié)果表明,Pfu 高保真熱啟動聚合酶對所有GC含量的擴(kuò)增效率相似,證明了它適用于需要低GC偏差的擴(kuò)增。
適用于含有高抑制劑樣本的多重?cái)U(kuò)增
對20%全血樣本中6個(gè)靶標(biāo)進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增。Pfu熱啟動高保真聚合酶對含有EDTA的全血顯示出更好的擴(kuò)增效率。
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