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DNA的提取方法

更新時(shí)間:2024-07-22點(diǎn)擊次數(shù):1307
  DNA的提取方法
  DNA的提取可以簡(jiǎn)單的分為裂解和純化兩大步驟,裂解是破壞樣品細(xì)胞結(jié)構(gòu),從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過(guò)程,純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分,如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)徹d分離的過(guò)程。下面讓我們一起來(lái)看看DNA的提取方法都有什么吧!
  一、高鹽沉淀法
  高鹽沉淀法是酚氯仿抽提方法的一種變體,它簡(jiǎn)化了酚氯仿抽提的繁瑣操作,并克服了其缺點(diǎn),只是得到的DNA純度不夠穩(wěn)定。
  二、酚氯仿抽提法
  酚氯仿抽提是一種有效的蛋白質(zhì)去除方法,但如果裂解體系中的蛋白質(zhì)含量超過(guò)了其飽和度,蛋白質(zhì)就無(wú)法完q去除,需要進(jìn)行多次反復(fù)抽提,而每次抽提都會(huì)導(dǎo)致核酸的損失。酚氯仿抽提的大優(yōu)勢(shì)在于成本低廉,對(duì)實(shí)驗(yàn)條件要求較低。
  三、柱式法
  過(guò)柱法利用特定的固相介質(zhì),在一定條件下,選擇性地吸附核酸而不吸附蛋白質(zhì)和鹽,實(shí)現(xiàn)核酸與蛋白質(zhì)及鹽的分離。這是目前廣泛使用的試劑盒提取方法。
  離心柱法DNA提取具有比傳統(tǒng)的酚氯法提取更高的純度,有利于RNA保護(hù),并且能夠進(jìn)行微量操作。由于其低廉的價(jià)格和相對(duì)便捷的操作,逐漸取代了傳統(tǒng)的DNA提取方法,受到了高??蒲械仁袌?chǎng)的廣泛認(rèn)可。
  四、磁珠法
  該方法將純化介質(zhì)包覆在納米級(jí)磁珠表面,通過(guò)介質(zhì)對(duì)DNA的吸附,利用外加磁場(chǎng)使DNA附著于磁珠并定向移動(dòng),從而實(shí)現(xiàn)核酸與其他物質(zhì)的分離。磁珠法的優(yōu)勢(shì)在于提供高質(zhì)量、高通量的核酸提取效果,滿足現(xiàn)代對(duì)提取效率的需求;它具有高靈敏度(只需微量樣本)、分離速度快(磁場(chǎng)分離僅需幾秒鐘)的特點(diǎn)。
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