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細胞凍存有何注意事項?

更新時間:2023-09-11點擊次數(shù):1975

細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常用技術(shù)。原理是將細胞放在-196℃液氮中,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài),減少細胞代謝,理論上儲存時間幾乎是無限的。那么細胞凍存有何注意事項呢?讓我們一起來看看吧!

一、DMS0稀釋時會釋放大量熱量,不能直接加到細胞液中,須事先配制,且DMSO必須是細胞培養(yǎng)級別的;

二、緩慢冷凍,細胞逐步脫水,不會因產(chǎn)生大的冰晶而受到損害;

三、選擇細胞生長良好、密度約為80-90%、活力達90%以上的細胞凍存;

四、凍存時細胞密度少于5X105個活細胞/mL時,很難成功復(fù)蘇;

五、細胞不可長期保存在-80°C冰箱中。我們建議在-80°C冰箱中的保存時間不要超過48h,放入液氮中保存;

六、凍存細胞操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷;

七、凍存管的蓋子一定要擰緊,否則復(fù)蘇水浴時會滲水,造成支原體污染;

八、定期檢查液氮儲備,保證細胞全部浸在液面下;

九、凍存細胞時在每支凍存管都標上細胞的名稱,凍存時間,并記錄在冊,避免取錯細胞,找不到凍存管等情況;

十、細胞在冷凍過程中在-20C冰箱內(nèi)放置時間不可超過1小時,以防止冰晶過大而破壞細胞。

更多有關(guān)細胞凍存的注意事項問題,請聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司:



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