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細(xì)胞轉(zhuǎn)染的分類方法

更新時(shí)間:2023-10-19點(diǎn)擊次數(shù):1294
  細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源性基因?qū)氲郊?xì)胞內(nèi)的技術(shù)。那你知道細(xì)胞轉(zhuǎn)染的分類方法是什么嗎?讓我們一起來看看吧!
  一、根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在的時(shí)間長(zhǎng)短,可分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
  瞬時(shí)轉(zhuǎn)染:指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過某種方式導(dǎo)入到哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi),該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細(xì)胞自身的基因組上。
  細(xì)胞中瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的外源基因表達(dá)時(shí)間有限,通常僅持續(xù)幾天,直到外源基因在細(xì)胞分裂過程中因各種因素丟失為止。多用于啟動(dòng)子和其他調(diào)控元件的分析。
  穩(wěn)定轉(zhuǎn)染:外源DNA整合到細(xì)胞基因組中或作為附加體質(zhì)粒保留在細(xì)胞中。與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不同,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能夠整合到宿主基因組,因此轉(zhuǎn)染細(xì)胞及其子代細(xì)胞的基因組中會(huì)同時(shí)保留轉(zhuǎn)染的DNA。
  由于穩(wěn)轉(zhuǎn)效率較低,因此選用有效的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法很重要。
  二、根據(jù)轉(zhuǎn)染方式可以分為化學(xué),生物,物理方法
  化學(xué)方法:利用載體分子包被核酸使其呈現(xiàn)中性電荷或正電荷。如陽(yáng)離子脂質(zhì)體方法、磷酸鈣共沉淀法、其他陽(yáng)離子物質(zhì)介導(dǎo)等技術(shù)。
  生物方法:利用基因工程病毒轉(zhuǎn)染非病毒基因到細(xì)胞中?,F(xiàn)在比較多見的是各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。
  物理方法:在細(xì)胞膜表面產(chǎn)生一個(gè)瞬時(shí)的孔從而導(dǎo)入DNA。如電穿孔法、顯微注射法。
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