一、試劑盒簡(jiǎn)介

microRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（大包裝）采用加A法來(lái)進(jìn)行microRNA第一條鏈cDNA的合成。含基因組DNA去除步驟，在室溫反應(yīng)5分鐘即可去除基因組DNA的污染，保證后續(xù)結(jié)果更加可靠。然后通過(guò)Poly(A)Polymerase在microRNA的3’末端加多聚Poly(A)尾，再使用 Oligo(dT)-Universal Tag通用逆轉(zhuǎn)錄引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，最終生成microRNA的cDNA第一鏈。

二、產(chǎn)品組分

Components EZB-miRT2-L 

gDNA Remover 55 μl 

miRNA RT Enzyme Mix*1110 μl

4x miRNA RT Buffer2 275 μl 

Nuclease free ddH2O 1 ml 

注:以上表格中的反應(yīng)次數(shù)對(duì)應(yīng)于20u反應(yīng)體系的用量。

*1:包括E.coli Poly(A)Polymerase、逆轉(zhuǎn)錄酶和RNase Inhibitor

2:包括Oligo(dT)-universaltag通用逆轉(zhuǎn)錄引物、ATP、buffer和dnTPs。

三、保存條件

microRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（大包裝）建議置于-20℃保存。

四、試劑盒特點(diǎn)

1、通用的加A尾反轉(zhuǎn)錄原理，一次反轉(zhuǎn)樣品中的不同microRNA.

2、可使用同一RNA模板進(jìn)行不同microRNA的定量檢測(cè)，節(jié)省樣品用量。

3、試劑盒建議與2xgPCR Mix for microRNA一起使用，只需設(shè)計(jì)特異性的上游引物即可。

4、可對(duì)低至50copies的microRNA進(jìn)行檢測(cè)，靈敏度高。